用PCR產物來PCR?

這聽起來像繞口令的問題，是在醫院工作的小朋友打電話來問的。
因為他們做PCR檢驗的時候會放一個陽性對照組，也就是病原體，來與病人的檢體一起比較。
如果每次都用病原體樣本，總會有用光的時候，就會需要再購買或是培養，需要耗費一些人力物力。
所以他想到的是：「用陽性對照組的PCR產物來作為下一次陽性對照組PCR的模板」
這樣就不會耗費珍貴的病原體了!

所以他的問題是：

「連續用相同引子對的PCR產物來PCR是可以不斷持續下去的嗎?」

這個問題很好，好到大概只有老師傅才知道答案 XD

因為我們現在PCR用的引子都是化學合成出來的，而化學合成的產率實際上大多都不會達到百分之百的。
換句話說，如果你買的合成引子不是用貴貴的PAGE或HPLC純化，而只是用便宜的方案簡單地去掉合成反應後的多餘鹽類。
那你在重複幾次PCR之後，很可能你的PCR產物就不是你想的PCR產物了 XD

所以如果負擔得起，用PAGE純化的引子當然是最好，不然就還是乖乖拿病原體來當作陽性對照組，可省下之後還要糾錯的麻煩 😊