取 50 μL 的 K. marxianus 酵母菌殖入 5 mL 的 YPD 中，於 30oC 震盪 200 rpm 培養 12~16 小時。測其1/100濃度之O.D.600值，計算植入菌液50 mL YPD後O.D.600為0.2之量，再植菌。